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避免牛血清沉淀的技巧
点击次数:162 发布时间:2018-06-06
   避免牛血清沉淀的技巧
  牛血清是细胞培养中用量zui大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成份,具有极为重要的功能。牛血清提供对维持细胞指数生长的激素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。牛血清提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。牛血清提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他激素等,能结合或调变它们所结合的物质活力。有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到解毒作用。牛血清是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。起酸碱度缓冲液作用。
  在细胞培养过程中,应该遇到过使用的牛血清产生沉淀的问题,溶解后有沉淀,往往还怕是染菌,即使不是染菌有些沉淀在细胞瓶内也会影响生长,注意一些小的细节还是非常有必要的。小技巧之避免牛血清沉淀:
  一般推荐在-20℃储存胎牛血清,避免反复冻融。
  解冻牛血清时,请按照所建议的逐步解冻法(-20℃至4℃至室温),若血清解冻时改变的温度太大(如-20℃至37℃),非常容易产生沉淀物。
  解冻牛血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。
  请勿将牛血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害,而影响血清的质量。
  牛血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。
  若必须做牛血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。
  温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成牛血清沉淀物的增多。
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