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大鼠elisa试剂盒检测步骤及注意事项
点击次数:126 发布时间:2018-06-04
   大鼠elisa试剂盒检测步骤及注意事项
  大鼠elisa试剂盒以灵敏度较高、特异性较好的特点在科研上得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。大鼠elisa试剂盒可以检测多少样品?在市场中,主要规格有两种,它们分别是48T和96T,48T可测42个标本,96T可测94个样本。标本收集与保存:避免使用肉眼可见的溶血标本、高脂标本和混浊标本;2-8℃下,标本可放置24-48小时,长期保存需放置-20℃下,请避免反复冻融。
  大鼠elisa试剂盒在检测样品的过程中,请注意:
  ①洗涤液:用前配制,有的试剂盒会标明,配好的4度下一般可以放一个月,如果没有标明,尽量用新鲜的,不要多配制;
  ②显色液(有A液和B液的),用前15分钟配制;
  ③标准品:有的大鼠elisa试剂盒中标准品是已经配制好的,4度保存,有的是要现配制的,按照大鼠elisa试剂盒说明书操作;
  ④浓缩生物素结合的二抗和HRP:如果需要配制,大鼠elisa试剂盒没注明配好可以保存多久的话,尽量现配现用(用前15分钟配制);原则是大鼠elisa试剂盒上没有指出配制物的储藏方式的话,应该现配现用;不要怕麻烦;还有小瓶的管子开盖前要离心,以免盖子上粘连以后总量不够;
  ⑤加样:室温温育的试剂,特别是温育时间比较短的实验操作的试剂,加样对数据的影响比较大,特别要注意加样问题。
  大鼠elisa试剂盒实践过程技巧:
  1.操作前应对实验的物理参数有充分的了解,如环境温度(保持在18C~25℃)、反应孵育温度和孵育时间、洗涤的次数等,要先查看水育箱温度,大鼠elisa试剂盒是否符合求。
  2.正确使用加样器加样器应垂直加入标本或试剂,避免刮擦包被板底部。大鼠elisa试剂盒加样过程中避免液体外溅,血清残留在反应孔壁上,加样器吸头要清洗干净,避免污染,加样次序要与说明书一致,否则可导致结果错误,实验重复性差。
  3.手工洗板加洗液时冲击力不要太大,洗涤次数不要超过说明书推荐的洗涤次数,洗液在反应孑L内滞留的时间不宜太长。不要使洗液在孑L间窜流,造成孔问污染,导致假阴性或假阳性。
  4.要保证加液量一致我们在使用时感觉滴瓶加液不如加样器好,滴瓶不易控制加液量不准,造成显色不统一,判断错误。
  5.显色液量不可过多加样的工作环境不能处于阳光直射的环境下,加显色系统后要避光反应,显色液量不能过多,以免显色过强。大鼠elisa试剂盒的影响因素应选用有国家批准文号,质量靠得住的产品,不能图便宜,忽视质量保证。试剂应妥善保存于4℃冰箱内,在使用时先平衡至室温,不同批号的试剂组分不宜交叉使用。试剂开启后要在一周内用完,剩余的试剂下次用时应先检查是否变质,显色剂如被污染变色将造成全部显色,导致错误结果。
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